產(chǎn)品詳情

雞肺動(dòng)脈平滑肌細胞

基本信息

產(chǎn)品名稱(chēng) ： 雞肺動(dòng)脈平滑肌細胞

產(chǎn)品品牌 ： 紀寧生物

組織來(lái)源 ： 肺動(dòng)脈組織

產(chǎn)品規格 ： 5×105cells/T 25細胞培養瓶

細胞簡(jiǎn)介

雞肺動(dòng)脈成纖維細胞分離自肺動(dòng)脈組織；肺動(dòng)脈亦稱(chēng)肺動(dòng)脈干。在呼吸空氣的脊椎動(dòng)物中，把靜脈血由心臟導向肺臟的動(dòng)脈。肺大動(dòng)脈起于右心室，在主動(dòng)脈之前向左上后方斜行，在主動(dòng)脈弓下方分為左、右肺動(dòng)脈，經(jīng)肺門(mén)入肺。肺動(dòng)脈干位于心包內，為一粗短的動(dòng)脈干。起自右心室，在升主動(dòng)脈前方向左后上方斜行，至主動(dòng)脈弓下方分為左、右肺動(dòng)脈。左肺動(dòng)脈較短，在左主支氣管前方橫行，分二支進(jìn)入左肺上、下葉。

右肺動(dòng)脈較長(cháng)而粗，經(jīng)升主動(dòng)脈和上腔靜脈后方向右橫行，至右肺門(mén)處分為三支進(jìn)入右肺上、中、下葉。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細胞分化而來(lái)；成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動(dòng)旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著(zhù)十分重要的作用。剛分離的肺動(dòng)脈成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。

30min細胞貼壁，其中部分開(kāi)始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(cháng)，不聚集成團；細胞生長(cháng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長(cháng)，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。肺動(dòng)脈成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括：構造和維持肺動(dòng)脈的正常形態(tài)；合成和釋放細胞外基質(zhì)；組織損傷后及時(shí)大量聚集修復損傷組織。

方法簡(jiǎn)介

紀寧生物實(shí)驗室分離的雞肺動(dòng)脈平滑肌細胞采用膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來(lái)，細胞總量約為5×105cells/瓶 。

質(zhì)量檢測

紀寧生物實(shí)驗室分離的雞肺動(dòng)脈平滑肌細胞經(jīng)α-SM A 免疫熒光鑒定，純度可達90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息

培 養  基 ： 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptom ycin等

換液頻率 ： 每2-3天換液一次

生長(cháng)特性 ： 貼壁

細胞形態(tài) ： 成纖維細胞樣

傳代特性 ： 可傳5代左右。3代以?xún)葼顟B(tài)最佳

傳代比例 ： 1:2

消 化  液 ： 0. 25% 胰蛋白酶

培養條件 ： 氣相：空氣，95% 。C O2，5%

雞肺動(dòng)脈平滑肌細胞體外培養周期有限。建議使用紀寧生物配套的專(zhuān)用生長(cháng)培養基及正確的操作方法來(lái)培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態(tài)。

細胞培養狀態(tài)

發(fā)貨時(shí)發(fā)送細胞電子版照片

使用方法

雞肺動(dòng)脈平滑肌細胞是一種貼壁細胞，細胞形態(tài)呈成纖維細胞樣，在紀寧生物技術(shù)部標準操作流程下，細胞可傳5代左右；3代以?xún)葼顟B(tài)最佳；建議您收到細胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗。

客戶(hù)收到細胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作

1.取出T 25細胞培養瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態(tài)。

2.貼壁細胞消化

1)吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次。

2)添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中，輕微轉動(dòng)培養瓶至消化液覆蓋個(gè)培養瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀(guān)察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養基終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的完全培養基5m L，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。

4)待細胞完全貼壁后，培養觀(guān)察；之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。

3.細胞實(shí)驗

因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實(shí)驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時(shí)，需要對實(shí)驗器皿進(jìn)行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴(lài)氨酸PLL（0.1m g/m l），明膠（0.1% ），依據細胞種類(lèi)而定。懸浮/半懸浮細胞無(wú)需包被。

雞肺動(dòng)脈平滑肌細胞

注意事項

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

2. 在細胞培養過(guò)程中，請注意保持無(wú)菌操作。

3. 傳代培養過(guò)程中，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(cháng)，否則會(huì )影響細胞貼壁及其生長(cháng)狀態(tài)。

4. 建議客戶(hù)收到細胞后前3天每個(gè)倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和紀寧生物技術(shù)部溝通。由于運輸的原因，個(gè)別敏感細胞會(huì )出現不穩定的情況，請及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪(fǎng)直至問(wèn)題得到解決。